植物组织培养校本教材123 - 图文(5)
配制要求:
1)按试剂种类分别称量、分别溶解,以防止产生沉淀。 2)配制采用纯度较高的蒸馏水或去离子水。
3)配制所用试剂应选用等级较高的分析纯或化学纯药品,以免带入杂质。
4)母液一经发现出现沉淀、长菌或变质则停止使用。 配制方法:
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1)大量元素母液
大量元素一般配成浓度10倍或20倍的母液。配制时应分别称量、溶解,充分溶解后才能混合,混合时注意先后顺序,特别要将钙离子与硫酸根和磷酸根离子错开,以免产生沉淀,混合时要慢,边加边搅拌,然后定容至容量瓶。必要时应将钙单独配制。
2)微量元素母液
微量元素一般配成100倍或200倍的母液,配制要求同大量元素。 3)铁盐溶液
铁盐溶液通常配成100倍或200倍母液。称取定量的硫酸亚铁和EDTA,分别充分溶解,再混合,调节PH至5.5,定容倒入棕色试剂瓶。
4)有机物母液
有机物母液一般配成100倍或200倍溶液,琼脂、蔗糖等可现用现配。 5)植物生长调节剂母液
植物生长调节剂大多难溶于水,应先用少量的适当溶剂(稀酸、稀碱、酒精)溶解,再加水定容至刻度。一般配成1mg/L或0.1mg/L,配制50或100ml贮存于棕色瓶中。
母液配制好后,应贴上标签,注明母液名称、配制倍数、日期等。有机物母液、植物生长调节剂母液最好放入冰箱中保存,如出现沉淀、变质等应重新配制。见MS培养基配制表3-1 3.2.3.2 培养基的配制
1)将母液按顺序摆好,按照培养基配方的数量计算所需成分的量,进行量取。根据配制的量,称取凝固剂、蔗糖。
2)在容器内加入1/3的纯水,按计算量加入琼脂融煮,等琼脂完全溶解后,依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节素及其他添加物,最好加入蔗糖,搅拌均匀。
3)加水至规定体积,搅拌均匀。
4)调节PH值。培养基配好后,应立即调节PH值,根据不同的中草药植物对PH值的要求不同,一般调节范围为5.3-6.0,用盐酸(氢氧化钠)1.0mol/L,
搅拌均匀后再测定。
5)分装。已经配好的培养基应及时分装,防止放臵后凝固,分装至接
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