植物组织培养校本教材123 - 图文(11)
来源:网络收集
时间:2026-07-13
导读:
以上配好的母液需贮存于2~4摄氏度的冰箱中,定期检查有无沉淀或微生物的污染,如出现霉菌,浑浊或沉淀,则不可再用。 3.培养基的配制: 以配制1000ml为例,按 每升培养基要求含量/每ml母液含量=母液吸取量公式,分
以上配好的母液需贮存于2~4摄氏度的冰箱中,定期检查有无沉淀或微生物的污染,如出现霉菌,浑浊或沉淀,则不可再用。 3.培养基的配制:
以配制1000ml为例,按 每升培养基要求含量/每ml母液含量=母液吸取量公式,分别吸取母液1、母液Ⅱ、母液Ⅲ、母液Ⅳ各50ml、1ml、10ml、10ml及一定量的各种植物激素混合后,再加3%蔗糖及预先以一定量蒸馏水加热熔化的琼脂,然后加蒸馏水定容至于1000ml,最后用NaOH调节PH至要求值(5.4~6.0
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之间的一特定值),然后分装入瓶,以100ml,三角瓶为例,每瓶装培养基40ml,共装25瓶,然后盖上盖瓶(4层),扎紧后灭菌。 4.培养基灭菌
培养基灭菌一般采用湿热灭菌法,即将分装好的培养基放在高压灭菌锅中,加热,待压力上升到0.5kg/cm2时,打开放气阀排净冷空气,关闭放气阀继续加热使压力稳定在1.1~1.2kg/cm2,温度为121摄氏度的条件下,维持15~20分钟,培养基灭菌时间不宜过长,以防引起培养基成分的变化,灭菌后的培养基臵于室温下贮存(最适宜的温度为10摄氏度),一般培养基在灭菌后二星期内应用。 六、考核
按分组情况,观察各分组的培养基配制情况,澄清度、配制的准确性、操作标准、灭菌效果以及实训完成后的整理。
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