验测定血清缺血修饰白蛋白

验测定血清缺血修饰白蛋白

超滤法白蛋白钴结合试验测定血清缺血修饰白蛋白

孙振荣 戴屹东 朱剑骞 周懿忆 王海平 江 铭

［摘要］目的：评估超滤法白蛋白钴结合试验测定血清缺血修饰白蛋白（IMA）的临床应用价值。方法：对超滤法白蛋白钴结合试验进行方法学评估，并用该法对30例cTnI指标为阳性的急性心绞痛或心梗缺血患者和50例健康体检者的血清IMA进行了检测和比较。结果：精密度试验二个标本的批内CV分别为2.75%和3.0%，批间CV分别为3.78%和4.15%。线性试验结果r=0.99。溶血标本对实验基本无干扰，而低白蛋白血清标本，可使IMA测定值呈假性升高。患者组与健康对照组血清IMA值差异高度显著（P＜0.01）。结论：超滤法白蛋白钴结合试验测定血清缺血修饰白蛋白，实验重复性良好，可抗实验背景中大分子物质引起的干扰，适合临床应用。

关键词：超滤法白蛋白钴结合试验 缺血修饰白蛋白 心肌缺血标志物

Albumin cobalt binding test （ultrafiltration assay） for determination of serum

ischemia modified albumin

SUN Zhen-rong,DAI Yi-dong,ZHU Jian-qian,ZHOU Yi-yi,WANG Hai-ping,JIANG Ming

Shanghai Jiao Tong University School of Medicine Ruijin Hospital Luwan Branch

[Abstract] Objective: Assessment of the clinical value for albumin cobalt binding test（ultrafiltration assay）for

determination of serum ischemia modified albumin (IMA) .Method: methodological evaluate for albumin cobalt

binding test （ultrafiltration assay）, and use this method to test and compare the surem IMA between 30 acute

angina or myocardial ischemia patients whose cTnI identifiers are positive and 50 healthy persons. Result: For the

precision test, the within-run CV of the two samples is 2.75% and 3.0%,and the between-run CV is 3.78% and 4.15%. For the linearity test result, r=0.99. Haemolytic sample has no disturbance for the test, but the sample of hypoalbuminemia can make IMA test value be falsely increasing. The difference of the serum IMA value between patients and the compared healthy group is obvious (P＜0.01).Conclusion: Using the method to evaluate the ischemia modified albumin, the result can be frequently duplicated, and there is little background interference caused

by macromolecular substances. The albumin cobalt binding test （ultrafiltration assay）is suitable for clinic.

[Key words] Albumin cobalt binding test（ultrafiltretion assay） Ischemia modified albumin,IMA Markers of myocardial ischemia

缺血修饰白蛋白（Ischemia Modified Albumin，简称IMA）可与心肌肌钙蛋白（cTn）、等心肌损伤标志物及心电图（ECG）联合使用，用于临床对急性冠状动脉综合症

[1]

（ACS）的辅助诊断和危险性分级。且IMA为心肌缺血标志物，能在心肌细胞坏死前或ACS早期可逆阶段检出，对降低心血管病高危个体的漏诊率及排除非心肌缺血病人具重要意义。IMA的实验室检测多采用白蛋白

[收稿日期]

[作者单位] 上海交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院检验科，200020

[作者简介] 孙振荣（1952年），男，付主任技师。联系电话：13501901168 ；E-mail：sunzhenrong@http://doc.guandang.net

钴结合方法（Albumin Cobalt Binding test，

[2]

简称ACB），该方法受标本溶血等多种因素干扰，限制了IMA测定的临床应用。本文在原有白蛋白钴结合试验的基础上，经离心超滤后检测血清IMA，实验表明可有效地减少溶血对实验的干扰。

一、资料与方法 1、资料

1、1样本来源：选用cTnI指标为阳性的急性心绞痛或心梗缺血患者标本30例；健康参考个体来源于本院不同性别、年龄的无缺血性疾病正常体检者50名。

1、2仪器：GF EII型生化分析仪（山东高密彩虹分析仪器有限公司）。

验测定血清缺血修饰白蛋白

1、3超滤管：美国MILLIPORE公司生产Microcon Ultracel YM-30（30KD）。

1、4试剂和质控品：IMA检测试剂盒和质控品均由上海微银生物技术有限公司提供，检测试剂盒批号为NHU0614。

2、方法

2、1取100ul血清加入到离心超滤管中，加100ul质控品于普通离心管中，并分别按序加入氯化钴溶液200ul，磷酸盐溶液 200ul。摇匀后37℃水浴5min。再将上述超滤管放入高速离心机中，10000rpm离心15min。取样品滤除液和质控品150ul分别加入比色管中，空白对照管中采用去离子水150ul，每管加入DTT显色剂 450ul，混匀后在GF EII型全自动生化分析仪上以空白对照调零，分别测定样品及质控品的O.D值（光径1cm，波长470nm），根据样品的O.D值，即可定量测定IMA，用U/ml表示。

2、2采用SPSS 11.5统计软件包进行统计学分析，患者组和健康对照组血清IMA值用x±s表示，二组IMA值的比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

二、实验结果 1、精密度试验

1.1、批内CV：取IMA高值和低值的两个质控品，分别测定20次，IMA高值质控品实测值为110.0±3.03 U/ml，批内CV2.75%，IMA低值质控品实测值为57.8±1.74U/ml，批内CV3.0%。

1.2、批间CV：将上述两个质控品分装后，低温-20℃保存，测定前室温融溶。每天测定4次，共五天测得的20个数据计算结果，IMA高值质控品实测值为110.4±4.17 U/ml，批间CV3.78%，IMA低值质控品实测值为57.6±2.39U/ml，批间CV4.15%。

2、线性实验:用上海微银生物技术有限公司提供的IMA值为40U/ml和150U/ml的质控液，按10∶0；7.5∶2.5；5∶5；2.5∶7.5及0∶10等不同比例混匀，得到IMA值分别为40U/ml、67.5U/ml、95U/ml、122.5 U/ml和150 U/ml混匀液进行线性试验，将测得的OD值与IMA理论值作统计分析，结果显示线性良好（y=3.159x+1.07；r=0.99）。

3、干扰试验

3.1、溶血干扰：自制溶血液，经Beckam Gen’S血球分析仪五次重复测定，血红蛋白含量为113g/L。将此溶血液用生理盐水按10∶0；8∶2；6∶4；4∶6；2∶8等不同倍数稀释后，分别取0.1ml与IMA值为34U/ml的标本0.9ml混匀后检测IMA。实验表明当混匀液中血红蛋白含量达11.3 g/L时，实测IMA值为36U/ml，示溶血标本对本法测定IMA基本无干扰。

3.2、低白蛋白标本影响：取血清白蛋白为41.0 g/L的标本，用生理盐水按3∶1；1∶1；1∶3等不同比例稀释，使稀释液中白蛋白含量分别为30.8 g/L；20.5 g/L和10.3g/L，以原液为1号，按序编号，并测定IMA值，结果见图。当白蛋白含量为30.8 g/L时，其IMA值与原液基本相同。当白蛋白含量低于20.5 g/L时，随稀释比例增加， IMA值逐渐升高。

4、患者组与健康对照组血清IMA比较：结果见表。

表、患者组与健康对照组血清IMA比较

组别 例数 IMA均值 t值 P值 对照组 50 56.8±7.99 14.497 ＜0.01 患者组 30 102.9±16.6

三、讨论

美国Bar-or D等1999年发现ACS患者

血清中，白蛋白结合外源钴（Co2+

）的能力

降低[3]

。后来证实这种白蛋白与心肌缺血密切相关。由于缺血时白蛋白受羟自 …… 此处隐藏：4095字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……