荧光法研究Gemini表面活性剂与BSA的相互作用

应用荧光法研究了Gemini表面活性剂(G14-3-14)与牛血清白蛋(BSA)在不同温度条件下的荧光猝灭现象,利用荧光猝灭双倒数图计算了G14-3-14与BSA之间的结合常数,并根据热力学参数确定了二者之间的作用力类型。用内源荧光法求得它们在30℃和35℃温度下的结合常数分别为K1=1.01×105L.mol-1和K2=5.45×106 L.mol-1,结合位点数分别为0.9978和0.9977。根据不同温度时的结合常数,求得G1

第 2 9

2 1 3月 0 1年

Chn s u m a f i e eJ u l t o r o Co n

胶体与聚畲物 l l oi& o m r d&p— e l y

V0.9 No 1 1 . 2 M a . 01 r2 1

DO: . 6￣i n10 -8 52 1.1 1 I 03 9 .s.09 11 . 0 . 0 1 9 s 01 0

荧光法研究 Ge n表面活性剂 mii与 B A的相互作用 S刘磊 陈凌宇郑星吴康冯亚珍(湖北大学化学化工学院，武汉 4 0 6 ) 3 02

摘要：应用荧光法研究了 Ge n表面活性剂( mii G )与牛血清白蛋( S在不同温度条件下的荧光猝灭 B A)现象，利用荧光猝灭双倒数图计算了 G与 BS A之间的结合常数，并根据热力学参数确定了二者之间的作用力类型。用内源荧光法求得它们在 3￣ 3" 0C和 5 C温度下的结合常数分别为 Kt1 1 l mo= . x 0 L。 l 0和 K= .5 25 x 4 1 mo, 0L l结合位点数分别为 097~ .9 8和 0 9 7根据不同温度时的结合常数， . 7。 9求得 G。与 B A的热力学参 S数(0为： 3℃)焓变 AH=3 .5 Jmo, 26 l熵变△S= 0 . - l ~自由能△G=一 90 Jto~ K一 2 35 Jmo K, 6 2 . K l。实验结果 3 o

表明， 主要以动态猝灭的方式使得 BS G A荧光强度显著降低， 和 B A主要凭借疏水作用结合。 G S关键词： mii Ge n表面活性剂；牛血清白蛋白；相互作用；荧光光谱法中图分类号： 5 . 06 7 4 3文献标识码： A文章编号：0 91 1(0 1o -0 1 3 10 8 52 1)10 3— 0

蛋白质一面活性剂复配体系在化妆品、表食品等领域有着广泛而重要的应用，白质和表面蛋活性剂相互作用的研究是多年来人们一直十分感兴趣的课题【】Ge n表面活性剂是一种新型 。 mii

一

1一十四烷基- 9基溴化铵 (牡。,文献问，双 3 - G。 按 ) 白( A, BS华美生物工程公司 )备液浓度为 1×贮 . 01 l使用时，二次水稀释到所需浓度。所 0 mo/ L;用

方法自制，备液浓度为 0 1 l牛血清白蛋贮 ./ 0 mo L;

的两亲分子，由两个亲水基和两个疏水基在其是

亲水头基处或靠近亲水头基处由一连接基团通

用试剂未注明均为分析纯，验用水为二次去离实子水。

过化学键连接而成，比单亲链表面活性剂具有更 1实验方法 . 2多优良的性质网对工业生产(。例如纺织染整、日用在 3℃和 3" O 5C温度下分别向 1lm的石英 xc化学品生产以及强化采油过程等)而言，表面活性比色皿中加人 2 mL S . A储备液， 9 B用微量进样器剂与大分子问的相互作用会显著影响体系的性逐次加入 20 l- lL .x 04 的 Gl mo¨l溶液。在荧光质，例如某些表面活性剂与大分子形成聚集体可分光光度计上，固定激发光波长为 2 0m,制 8n绘使体系的流变性发生显著变化。因而产品的质量 3 0 0n的荧光发射光谱图，并记录 3 8m 0￣5 0m 4n 与表面活性剂和大分子间的相互作用密切相关。 处的荧光强度。 对生物体系而言，面活性剂与蛋白质之问的相表互作用将直接影响生命过程。研究 G m i e i表面 n活性剂与蛋白质的相互作用对于实际生活生产有着重要作用。蛋白质 .表面活性剂复配体系不仅在药物、化妆品、生物及食品等领域中有着广

2结果与讨论21 对 B A的猝灭作用 . Gl S

B A的内源荧光来自于分子中色氨酸残基 S

泛的应用，而且还可用于模拟生物体系，对加快生物技术向化工、医药等传统领域的渗透和应用具有重要的意义。

和酪氨酸残基，荧光体在某些物质的作用下会发生荧光猝灭。固定 B A的量， S在其中加人 G,,溶液。随着表面活性剂浓度的增加， S的内源 BA荧光强度有规律地下降，但峰形不变，说明 G, 对 B A的荧光有猝灭作用， S而最大发射波长有明 显的蓝移现象，证明蛋白质的微环境发生了变化。按试验方法得到 B A的荧光猝灭光谱见图 S收稿日期：00 1—6 2 1—20

1实验部分 11实验仪器与试剂 .

R -4 F5 0型荧光分光光度计 (日本岛津 ) 5 L; 微量进样器 (宁波市镇海玻璃仪器厂 )。三亚甲基