山大威海分校生物化学练习集(2)

A.酶蛋白被水解成氨基酸 B.酶蛋白高级结构破坏 C.失去激活剂 8.进行酶活力测定时:

A.底物浓度必须极大于酶浓度 B.酶浓度必须极大于底物浓度 C.与底物浓度无关

三.问答题

1.有一个酶在0.01M的NaCl溶液中会丧失生物活性,但如果此溶液中同时含有0.01M的巯基乙醇,可以避免此酶失活,试问这是一个什么酶?

2.用AgNO3加入10ml（每ml含1.0mg蛋白质）纯酶溶液中使酶完全失活时，需用0.342微摩尔AgNO3，求该酶的最低分子量。

3．焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸，它的分子量为120000，右六个相同的亚基组成，纯酶的Vmax为2800单位/毫克酶（活力单位规定为：在标准条件下，37℃，每15分钟水解10微摩尔焦磷酸所需的酶量为一个单位），问：

（1）每毫克酶在每秒钟内水解多少摩尔分子的底物？

（2）每毫克酶中有多少摩尔的活性中心（假设每个亚基上有一个活性中心）？ （3）酶的转换数是多少？ 4．一个纯酶的磷酸丙糖异构酶制剂的比活力为每分钟每毫克酶蛋白能转化10000微摩尔的3-磷酸-甘油醛，如果其活性位点的分子量为26500，试将它表示成每千克的Katal数，并计算酶的转换率。

5．取0.5克蛋白酶制剂，先用50mlpH7.0的磷酸缓冲液浸泡，过滤后得滤液，从中取1ml稀释至20ml备用。

取上述稀释酶液，加入1ml酪蛋白，在30℃水浴中保温10分钟后立即加入2ml三氯醋酸，终止酶作用后过滤反应液，取1ml滤液与福林试剂作用，产生的兰色经比色测定知道含有48微克Tyr，求每克蛋白酶制剂的活力单位数？（此酶活力单位规定为30℃，pH7。0条件下，每分钟分解底物酪蛋白产生1微克Tyr为1个活力单位）。

6．当一酶促反应的速度为Vmax的80%时，Km与[S]之间为何关系？ 7．在米氏方程中，当[S]分别Km的2倍，1/10倍，1/2倍时，酶促反应速度v达到最大反应速度Vmax的百分之几？

8．过氧化氢酶的Km值为2.5x10-2摩尔/升，当底物过氧化氢浓度为100毫摩尔/升时，求在此浓度下，过氧化氢酶被底物所饱和的百分数。

9．当某一酶促反应的速度从最大速度的10%提高到90%时，底物浓度要作多少改变？当反应速度升到最大速度的95%时，底物浓度还要进一步作多少改变？ 10脲酶催化下述反应：

CO（NH2）2 + H20 → CO2 + 2NH3

在研究其活性和脲浓度的关系时得到下列关系：

脲浓度（毫摩尔/升） 30 60 100 150 250 400 速度（消耗的毫摩尔 337 553 742 894 1070 1204

脲/毫克酶/分钟）

求此反应的Km和Vm

11．一个酶的Km是4.7x10-5摩尔/升，最大反应速度是22微摩尔/分，在2x10-4

摩尔/升底物和下述抑制剂存在的情况下，反应速度v为多少？

（1）5x10-4摩尔/升竟争性抑制剂。

（2）5x10-4摩尔/升非竞争性抑制剂。 （3）5x10-4摩尔/升反竞争性抑制剂。 所有三种情-况的Ki都是3x10-4摩尔/升。