细胞生物学实验《细胞膜的渗透性》

细胞生物学实验

课程介绍细胞生物学是研究细胞基本生命活动规 律的科学， 律的科学，本课程的目的和任务在于通 过实验加深和巩固学生对基本知识和基 础理论的理解， 础理论的理解，初步掌握细胞生物学实 验的一些基本操作和基本技能， 验的一些基本操作和基本技能，培养学 生分析问题、解决问题的能力， 生分析问题、解决问题的能力，培养科 学务实的精神。 学务实的精神。

实验内容序号 1 2 3 4 5 6 7 实验名称 学时 2 2 2 3 3 3 33

细胞膜的渗透性 线粒体的活体染色与观察 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示 细胞核的分离与鉴定 细胞融合 人类体细胞染色体组型分析 动物染色体标本的制备与观察

实验一、 实验一、细胞膜的渗透性

一、实验目的了解溶血现象及其发生机制； 1. 了解溶血现象及其发生机制； 2. 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入 细胞的速度。 细胞的速度。

二、实验原理由于细胞膜对各种溶质的透性不同， 由于细胞膜对各种溶质的透性不同，将 红细胞放入数种等渗液中后， 红细胞放入数种等渗液中后，有的溶质 可以渗入，有的溶质不能渗入， 可以渗入，有的溶质不能渗入，渗入的 物质能够提高红细胞的渗透压，所以促 物质能够提高红细胞的渗透压， 使水分进入细胞，引起溶血。 使水分进入细胞，引起溶血。由于溶质 渗入细胞速度各不相同， 渗入细胞速度各不相同，因此溶血时间 也不相同。因此， 也不相同。因此，可以利用溶血时间粗 略的判断物质穿膜的速度和时间。 略的判断物质穿膜的速度和时间。6

三、实验材料1、实验器材50mL烧杯、10mL移液管、滴管、试管、 50mL烧杯、10mL移液管、滴管、试管、试管架 烧杯 移液管

2、试剂生理盐水、蒸馏水、 氯化钠、0.17mol/L氯 生理盐水、蒸馏水、0.17 mol/L 氯化钠、0.17mol/L氯 化铵、0.17mpl/L硝酸钠 0.12mol/L草酸铵 硝酸钠、 草酸铵、 化铵、0.17mpl/L硝酸钠、0.12mol/L草酸铵、 0.32mol/L葡萄糖 0.32mol/L甘油 0.32mol/L乙醇 葡萄糖、 甘油、 乙醇、 0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、

3、实验材料鸡血液

四、实验步骤1、鸡血细胞悬液的制备 取将35ml鸡血倒入350nl生理盐水中， 35ml鸡血倒入350nl生理盐水中 取将35ml鸡血倒入350nl生理盐水中，配成一 种不透明的红色鸡血细胞悬浮液2、溶血观察

往试管中加入10ml蒸馏水，再加入1ml鸡血细 往试管中加入10ml蒸馏水，再加入1ml鸡血细 10ml蒸馏水 1ml 胞悬液，摇动混匀， 胞悬液，摇动混匀，溶液有浑浊迅速变为澄清 透明，即红细胞膜发生破裂形成溶血。 透明，即红细胞膜发生破裂形成溶血。

四、实验步

骤3、鸡血细胞膜渗透性观察逐一量取6种等渗溶液各10ml,倒入试管中， 逐一量取6种等渗溶液各10ml,倒入试管中， 10ml 再逐一加入1ml鸡血细胞悬液，轻轻摇动混匀， 1ml鸡血细胞悬液 再逐一加入1ml鸡血细胞悬液，轻轻摇动混匀， 注意发生什么变化？溶液是否逐渐澄清透明？ 注意发生什么变化？溶液是否逐渐澄清透明？ 若是，记下时间， 若是，记下时间，即自加入鸡血细胞悬液到溶 液变成澄清透明所经历的时间。如果10min 10min溶 液变成澄清透明所经历的时间。如果10min溶 液仍然保持浑浊，则为不溶血。 液仍然保持浑浊，则为不溶血。

五、注意事项试管中有红细胞和测试溶液时， 1、试管中有红细胞和测试溶液时，不能 用力摇动， 用力摇动，避免人为因素造成的红细胞 破裂

六、实验结果记录观察到的实验现象， 记录观察到的实验现象，并对实验结果进行分析和比较试管编号 0、 5ml蒸馏水 1ml 稀释鸡血悬液 、 蒸馏水+ 蒸馏水 1、5ml 氯化钠 、 氯化钠+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 2、5ml 氯化铵 、 氯化铵+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 3、5ml 硫酸钠 、 硫酸钠+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 4、5ml 硝酸钠 、 硝酸钠+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 5、5ml 草酸铵 、 草酸铵+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 6、5ml 葡萄糖 、 葡萄糖+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 7、5ml 甘油 、 甘油+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 8、5ml 乙醇 、 乙醇+1ml稀释鸡血悬液 稀释鸡血悬液 是否溶血 时间 结果分析

试剂配制1.生理盐水： 1.生理盐水：氯化钠 0.9g ,蒸馏水 100.0ml 生理盐水 2.0.17 氯化钠溶液： 4.976g, 2.0.17 mol/L 氯化钠溶液：氯化钠 4.976g,蒸馏水 500ml 3.0.12mol/L硫酸钠溶液： 0.12mol/L硫酸钠溶液 8.5g, 3.0.12mol/L硫酸钠溶液：硫酸钠 8.5g,蒸馏水 500ml 4.0.17mol/L 硝酸钠溶液： 7.224g, 4.0.17mol/L 硝酸钠溶液：硝酸钠 7.224g,蒸馏水 500ml 5.0.17mol/L 氯化铵溶液： 4.574g, 5.0.17mol/L 氯化铵溶液：氯化铵 4.574g,蒸馏水 500ml 6.0.12mol/L草酸铵溶液： 0.12mol/L草酸铵溶液 4.62g, 6.0.12mol/L草酸铵溶液： 草酸铵 4.62g,蒸馏水 500ml 7.0.32mol/L乙醇溶液： 0.32mol/L乙醇溶液 9.33ml, 7.0.32mol/L乙醇溶液： 无水乙醇 9.33ml,蒸馏水 500ml 8.0.32mol/L甘油溶液： 甘油(1.26g/ml) 11.7ml, 0.32mol/L甘油溶液 8.0.32mol/L甘油溶液： 甘油(1.26g/ml) 11.7ml,蒸馏水 500ml 9.0.32mol/L 葡萄糖溶液 葡萄糖 28.83g,蒸馏水 500ml 9.0.32mol/L 28.83g,