血球计数板使用及相关计算

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每个大格里有400个小格每个大格的边长是1mm,深度是0.1mm故每个大格的 容积是0.1mm3,即10-4ml

(80小格内酵母细胞个数/80)×400×104 ×稀释倍数

血球计数板使用及相关计算

3、使用方法:

将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用 的盖玻片.将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖 玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取, 稍待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.加盖盖玻片.

血球计数板使用及相关计算

稀释培养液。稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以 每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. 当遇到位于方格线上的酵母菌,一 般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计 数下方和左方线上的酵母细胞). 8、血球计数板的清洁 血球计数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗 后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙 醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小 . 格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重 复清洗直到干净为止

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血球计数板的使用方法步骤

1.镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。 若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数； 2.加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用 的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边 缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生 气泡，多余培养液可用滤纸吸去；

3.计数。稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部沉降到 计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下 找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。

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1.每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计 数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。

2.从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡 几下，这样使酵母菌分布均匀，求得的培养液中的酵母菌数 量误差小。 3.如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养 液进行稀释。具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液， 加入成倍的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数， 所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞 为宜。4.活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时， 即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个酵 母细胞。

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5.对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上 的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右 线”的原则处理，另两边不计数。 6.计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算， 对每个样品可计数三次，再取其平均值。7.血球计数板的清洁 血

球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗 后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、 丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是 否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直 到干净为止。

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例1、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若 计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小方格组 成，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 ▲ 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有 5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 ▲ 个。 (参考答案：稀释；2×108)

5×400×10000×10=2×108 。

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例2、 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法 检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管 吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余 液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成，容纳 液体的总体积为0.1 mm3。

现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个 小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 ▲个/mL。 (参考答案：5n×105 )

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例3、(2008江苏高考31.) (4)在整个实验过程中，直接从静置的培养瓶中取培 养原液计数的做法是错误的，正确的方法是 ▲ 和 ▲ 。 (5)实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板 的做法是错误的，正确的方法是 ▲ 。 (参考答案(4)摇匀培养液后再取样 样液稀释后再 计数(5)浸泡和冲洗)