食用菌栽培技术实验(2)

②接种与培养。栽培种也应在无菌箱或无菌室内按无菌操作要求接种，然后与原种同样条件进行培养。 【实验思考】 栽培种的制作过程当中那些操作容易引起污染，特别注意的问题有哪些？

实验四 食用菌的组织分离技术

【实验目的】

1、学习食用菌组织分离技术的特点 2、掌握食用菌的组织分离技术关键操作 【方法步骤】

组织分离法是利用子实体内部菌肉组织分离获得纯菌丝约一种方法。但子实体小、薄、胶质的菇体细胞已泡囊化的种类不太适用。组织分离法是一种无性繁殖过程，其方法操作简便，菌趁萌发快，遗传性稳定，后代不易发生变异，，能保持原菌株的优良特性，是生产上主要采用的分离方法。 组织分离法，根据分离材科的不同，大体可分为三种：子实体组织分离、菌核组织分离、菌索组织分离。

1．种菇(耳）的选择 从优良品系中选取优良的个体作种菇 (耳)，以单菇、朵大、肥壮、无病虫害的于实体作分离材料。

2．种菇的组织分离：首先进行种菇表面的无菌处理。然后切取接种块，即用无菌刀在菌柄或菌盖纵切一刀，撕开，挑取菌盖与菌柄交界处的一小决组织作为接种材料，此处组织的再生能力较强，切取菌盖或菌何任何一处亦可，接种块取象黄豆大小，接种到马铃薯培养基上，在25℃培养3—5天即可看到组织块上产生白色绒毛状的菌丝。 【实验思考】

1 食用菌组织分离培养法分离时极易污染杂菌，所以操作要注意哪些问题？ 2 分析食用菌组织分离培养法所适用的食用菌种的类别。

实验五食用菌的孢子分离技术

【实验目的】

1、学习食用菌孢子分离技术的特点 2、掌握孢子分离技术关键操作 【方法步骤】

孢子分离法有多孢分离和单孢分离。孢子是食用菌基本繁殖单位，用孢子来培养菌丝体是制备食用菌菌种的基本方法。这里指的孢子主要是担孢子和子囊孢子，是双亲的细胞核经配合(核配)而成的有性抱子，具有双重的遗传性．生命力强。但孢子分离法变异大，而且有些食用菌的担孢不易萌发成菌丝。采用多孢分离时，在适宜条件下孢子比较容易萌发，获得菌丝体。多孢分离所获得的菌丝体，基本上能形成子实体。对于一些不易进行组织分离，孢于易萌发的胶质菌类(如黑本耳、毛木耳)，采用多孢分离较易成功。 (1)种菇的选择和处理：供收集孢子的种菇，必须纯正、发育健壮，无病虫害。种菇的成熟度也要适当。如双孢蘑菇和草菇等有菌膜的食用菌，最好选菌膜将破而未破的．因为这样的种菇发育已成熟，而子实层又未污染，能很快散发出大量的无菌抱子。但对于没有菌膜的食用菌，如平菇，则应选取八成熟，将要释放孢子的菇体，经培养l一2天后．从担子上弹射出来的孢子基本上也是无菌的。种菇必须经过消毒，以清除沾在其表面的杂菌。凡子实层未外露的种菇，可用升汞溶液进行消毒。升汞是表面杀菌剂，种菇表面的蛋白质遇到升汞后立即形成蛋白汞，蛋白汞能阻碍升汞的进一步渗透，因此只要将种菇在0.1~0.2％的升汞溶液中浸泡2~3min，就能把沾染在菇体表面上的杂菌孢子杀死，而不伤害种菇子实体及其内部的菌丝。对于子实层巳外露的种菇不宜用升汞溶液浸泡，而只能用70％酒精在菌体表面进行揩擦消毒。消毒后必须用无菌水洗3次，洗掉表面沾附的药剂。