糖基化蛋白质糖基化蛋白质

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糖基化蛋白质03级化学系3班 03081094杨柳

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-引言人类基因组计划完成后，美国于2001年9月正式启动了“功能糖组学”研究项目，项目的总体目标就是阐明由蛋白质-糖链相互作用的介忖的细胞通讯机制。基因组计划提供了最基本的遗传信息。而许多基因的功能仍需要阐明。其中的关键就是要了解蛋白质翻译后的修饰，而蛋白质的糖基化便是最主要的翻译后修饰之一

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现代分子生物学的中心法则认为。生物信息的流向为DNA RNA蛋白质酶

糖类细胞复合糖

生物体

脂类

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什么是糖基化蛋白质？由酶将一个或多个糖元加合在最初的多肽链上，修鉓范围从蛋白质上连接单糖(比如胶原糖蛋白);到密集，复杂，有侧链的多糖以及具有复杂的氨基酸聚糖侧链的蛋白多糖。

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分类蛋白质糖基化分类是基于糖链和蛋白质的连接类型的，可分为三类。 N-糖基化，O-糖基化。糖基磷脂酰肌醇锚 (GPI-ANCHOR)糖基化 N-糖基化分为三种类型高甘露糖型：五糖核心上再连2-9个甘露糖复杂型：有更多的N-乙酰葡糖胺，半乳糖，唾液酸，岩藻糖及木糖与五糖核心相连混合型：兼具有以上两种糖链结构的特点

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研究蛋白质糖基化的常用方法糖基化电位点分析糖基化蛋白质分析

糖链分析

糖蛋白

单糖分析

糖链释放

蛋白酶水解氨基酸分析糖基肽肽链

去糖基蛋白

糖链

糖链释放

氨基酸序列分析

去糖基肽链糖链分 糖质 馏酶基谱核/纯化，结构分析解肽/寡多糖图谱磁共振

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检测技术O OH

荧光染色检测方法过碘酸O O OH H

o

H2NHNH

Pro-Q Emerald试剂O

H

Pro-Q Emerald试剂染色检测糖蛋白的三个步骤H NNH

H

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与凝集素联用的染色检测方法：蛋白质经过聚丙烯酰胺凝胶分离，印迹到聚偏二氟乙烯膜上，然后与结合了碱性磷酸酯酶解DDAO磷酸盐，生成长波的红色荧光的DDAO来检测。此方法检测糖蛋白的灵敏度约为15ng,依赖于蛋白质的性质和糖基化程度。PRO-Q有三类凝集素试剂盒：伴刀豆凝集素A用于检测末端有a-甘露糖吡喃糖苷残基或a-葡萄糖吡喃糖苷残基且不具有三天线或四天线结构的糖蛋白；小麦胚芽凝集素(WGA)用于检测有N-乙酰神经氨酸的糖；西非单叶豆凝集素用于检测末端有非还原性的N-乙葡糖胺的糖蛋白。还可以用结合了辣根过氧化物酶的伴刀豆凝集素素A或小麦胚芽凝集素等标记糖蛋白，再用显色剂显色。其它检测方法可用酶解或化学裂解的方法将糖链从糖蛋白中释放出来，经过2-氨基苯甲酸等标记，用毛细管电泳或高效液相色谱等分离，再由检测器检测，以及用质谱，核磁共掁等方法来

进行检测。

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展望蛋白质的翻译后修饰,包括糖基化，将证明是对于发生在生物学体系中“新陈代谢”的极好控制，当基因产品在蛋白质活性组织中被修饰时，这一点尤为明显，多糖结构中，可利用的广泛的差异性使其成为微调新陈代谢的最佳部分。而糖基化研究的基本目标就是寻找编码糖蛋白的基因(即基因组信息)寻找糖基化位点(即糖基化位点信息)析糖链及糖基化肽段的结构(即结构信息；研究糖基化的功能 (即功能信息)随着分离技术，检测技术的迅速发展，蛋白质糖基化研究的方法和策略也将呈现出多样性糖基化，蛋白组研究也将成为翻译后修饰研究中的一个新热点。