试验一分光光度法测定铁邻二氮菲络合物的组成

试验一分光光度法测定铁邻二氮菲络合物的组成

实验一分光光度法测定铁—邻二氮菲络合物的组成

一、目的要求：

1．掌握吸收光谱的绘制方法，加深理解Lamber-Beer吸收定律。

2．学习选择分光光度分析的条件，掌握用摩尔法测定络合物组成的基本原理和实验方法。

二、基本原理[见分析化学（上册）]

三、试剂和仪器

铁标准溶液：准确称取4.822 g NH4Fe(SO4)2.12H2O于100 mL烧杯中，加入20 mL(1+1)盐酸及少量水溶解，移入1 L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液含铁0.0100 mol/L，作为储备液。用时稀释成0.0010 mol/L的工作液。

邻二氮菲溶液：准确称取0.495 5 g邻二氮菲于100 mL烧杯中，加少量水溶解后，移入250 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液浓度为0.0100 mol/L。用时稀释成0.0010 mol/L的工作液。

1.0 mol/L醋酸钠溶液；10% 盐酸羟胺溶液（新鲜配制）。

紫外—可见分光光度计。

四、实验步骤

（一）绘制吸收曲线

取两只25 mL容量瓶，向其中一只加入1.0 mL铁工作溶液(0.0010mol/L)。然后在两只容量瓶中分别加入1 mL 10%盐酸羟胺溶液、4 mL 0.0010 mol/L 邻二氮菲溶液及5 mL 1.0 mol/L 醋酸溶液，用水稀释至刻度，摇匀。

在分光光度计上，用1 cm比色皿，以不含铁的溶液作为参比溶液，测量含铁溶液的吸收光度值。测定波长范围是460~560 nm, 每隔10 nm测定一个数值。以波长λ为横坐标、吸光度A为纵坐标绘制吸收曲线。由吸收曲线确定最大吸收波长λmax为测定波长

（二）验证Lamber定律

取0.5、1、2、3 cm的4个比色皿，分别盛入上述(一)中的溶液，以试剂空白作为参比溶液，在所选的测定波长下测定吸光度。以液层厚度为横坐标、吸光度为纵坐标作图，求出直线斜率和相关系数，并找出合适厚度的比色皿。（三）用摩尔比法测定络合物组成

取6只25 mL 容量瓶，各加入1.0 mL铁工作溶液（0.0010 mol/L）及1 mL 10% 盐酸羟胺溶液。然后分别加入邻二氮菲工作溶液（0.0010 mol/L）1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 、6.0 mL, 再各加入5 mL 1.0 mol/L 醋酸溶液，用水稀释至刻度，摇匀。

另取6只25 mL 容量瓶，配制与上述溶液相应的试剂空白溶液，即各瓶中除不加铁标准溶液外，其余试剂的加入量及加入顺序同上述溶液。以[R]/[M]为

试验一分光光度法测定铁邻二氮菲络合物的组成

横坐标、吸光度为纵坐标作图，由得到的两条直线外推交点来确定络合物的组成。

五、注意事项

1．盐酸羟胺易氧化，不能久置。盐酸羟胺和邻二氮菲溶液要现用现配。

2．测定络合物组成时应以不含铁并含等量邻二氮菲的溶液作为参比液。

实验二邻二氮菲分光光度法测定铁条件的研究及微量铁测定

一、实验目的

1．通过本实验学会分光光度法测定条件的选择方法

2．联系分光光度计的使用方法

二、实验原理

应用分光光度法进行定量分析时，通常要经过称样、溶解、显色及测量等步骤，其中显色反应条件是影响测定灵敏度和准确度的主要因素。显色反应条件包括显色剂用量、溶液酸度、显色反应时间和温度、试剂加入顺序及干扰物质的影响等，均需一一加以研究，以便拟定出最佳分析方案，使测定既准确又快速。本实验通过对Fe（Ⅱ）-邻二氮菲显色反应条件的研究，初步了解拟定分光光度法测定条件的方法。

邻二氮菲是测定微量铁的高灵敏性、高选择性试剂，邻二氮菲分光光度法是化工产品中微量铁测定的通用方法。在酸度为pH 2~9的溶液中，邻二氮菲和Fe2+生成橘红色配合物：

该化合物的lgK

= 21.3（20℃），在510 nm 处有最大吸收，摩尔吸收系数

稳

ε510 = 1.1×104L?mol-1?cm-1。

三、试剂和仪器

100 μg/mL铁标准溶液：准确称取0.8634 g NH4Fe(SO4)2.12H2O于100 mL烧杯中，加入20 mL盐酸(6.0 mol/L)及少量水溶解，移入1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。作为储备液。用时稀释成10.0μg/mL的工作液。

1.0 mol/L pH 5.0 NaAc-HAc缓冲溶液：称取分析纯NaAc.3H2O 32 g，溶于适量水中，加入6 mol/L HAc 68 mL, 稀释至500 mL。

1.0 mol/L HCl 溶液；0.4 mol/L NaOH 溶液；10% 盐酸羟胺溶液（新鲜配制）；

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0.12%邻二氮菲水溶液（新鲜配制）。

紫外—可见分光光度计，酸度计。

四、实验步骤

（一）测定条件的研究

（1）吸收曲线的绘制吸取分别取铁工作液（0.0010 mol/L）3.0 mL于50 mL 容量瓶中，加入1 mL的10% 盐酸羟胺溶液；振荡后，放置2 min。然后依次再加入5 mL缓冲溶液（pH 5.0）和2 mL的0.2%邻二氮菲水溶液，并摇匀，静置片刻，加水稀释至刻度。以蒸馏水为参比溶液，在波长440~560 nm范围，用3 cm比色皿测定吸收曲线，从吸收曲线上确定测定的适宜波长。

（2）有色配合物的稳定性用步骤1中所配制溶液，测定吸光度随时间的变化规律，找出有色配合物稳定的时间范围。在510 nm 波长下，用3 cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，每隔(3 min,30 min,1 h,1.5 h,2 h),测定一次吸光度值。以放置时间为横坐标、吸光度为纵坐标绘制A-t曲线，有曲线得出结论。

（3）显色剂用量影响取7个50 mL容量瓶，用移液管准确移取10.0 μg/m L 铁工作液 5.00 mL于各容量瓶中，加入10% 盐酸羟胺溶液1 mL，放置2 min 后，加入缓冲溶液（pH 5.0）5 mL，然后准确加入0.12 %邻二氮菲水溶液

0.20、0.40、0.60、1.00、1.50、2.00和3.00 mL，用水稀释至刻度，摇匀。

用3 cm比色皿，以蒸馏水为参比，在510 nm下，分别测定各溶液的吸光度。然后以加入邻二氮菲的毫升数为横坐标，各溶液的吸光度为纵坐标作

图。从曲线上确定显色剂的最适宜加入量。

（4）溶液酸度的影响吸取100 μg/mL铁标准溶液10.0 mL于100 mL容量瓶中，加入 2 mol/LHCl溶液10.0 mL，10% 盐酸羟胺溶液10.0 mL, 放置2 min后，加入0.12%邻二氮菲20.0 mL，以水稀释至刻度，摇匀。

取7个50 mL容量瓶，用移液管分别吸取上述溶液5.00 mL于各容量瓶中，然后用吸量管分别向各容量瓶中依次加入0.40 mol/L NaOH溶液

0.00、1.00、2.00、4.00、5.00、7.00及9.00 mL，以水稀释至刻度，摇匀，

使各溶液的pH从≦2开始逐渐增加至12以上。用3 cm比色皿，以蒸馏水为参比，在510 nm下分别测定各溶液的吸光度，然后用酸度计测定各溶液的pH值。以溶液的pH值为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘出A-pH曲线，并确定适宜的pH范围。

（二）样品中铁含量的测定

（1）标准曲线的绘制取6个50 mL容量瓶，用吸量管分别吸取10.0 μg/mL

试验一分光光度法测定铁邻二氮菲络合物的组成

铁标准溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00和5.00 mL于各个容量瓶中，各加入10% 盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，静置2 min。再各加缓冲溶液5 mL，0.12%邻二氮菲溶液2 mL，用水稀释摇匀。以试剂空白为参比，用3 cm比色皿，在510 nm下分别测定各溶液的吸光度，以铁的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

（2）试液中铁含量的测定准确吸取10.0 mL未知样品溶液于50 mL容量瓶中，以配制标准溶液同样的方法对未知溶液进行显色，并测定吸光度。根据吸光度曲线上查出的试液中的铁含量，并计算出原试液中的铁含量。

五、注意事项

1．配制溶液时，盐酸羟胺和缓冲溶 …… 此处隐藏：3073字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……