外生长的影响及相关实验技术的研究(2)

．仃ａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｎｌｉｄｅ．２）．２，５．二苯基四氮唑

嗅盐ｐＯｌｙｎｌｅｒａｓｅＲＴ－ＰＣＲｒｅＶｅｒｓｅ仃ａｎｓｃｒｉｐｔ：ｉｏｎ

ｃｈａｉｎＩ．ｅａｃｔｉｏｎ逆转录聚合酶链反应

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四种人参三醇组皂苗对小鼠骨髓ＭＳＣ体外生长的影响及相关实验技术的研究

第一部分：四种人参三醇组皂苷对小鼠骨髓

ＭＳＣ体外生长的影响

前言

１．人参皂苷的研究进展

１．１人参皂苷的分类

人参皂苷（ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ，ＧＳ）是人参的主要活性成分，目前已从人参和同源植物中分离出的人参皂苷单体及其活性衍生物约６０多种【１１。人参皂苷分子的多样性是由于苷元结构的不同和连接在苷元骨架上糖组分种类、数目和位置的差异。按照皂苷的系统分类，人参皂苷均属于三萜类皂苷。按苷元结构不同，人参皂苷可分为人参皂苷可分为达玛烷型（ｄａｍｍａｒａｌｌｅ．ｔｙｐｅ）、齐墩果烷型（ｏｌｅａｎａｎｅ—ｔｙｐｅ）及奥克梯隆醇型（ｏｃｏｔｉｌｌ０１．ｔｙｐｅ）。人参皂苷绝大多数属达玛烷型皂苷，且在人参中含量最丰富。达玛烷型人参皂苷又可分为原人参二醇组（ｐｒｏｔｏｐ锄ａ）（ａｄｉｏｌｇｒｏｕｐ）和原人参三醇组（ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉ０１ｇｒｏｕｐ），前者包括ＧＳ—Ｒｂｌ、－Ｒｂ２、．ＲＣ、一Ｒｄ、－Ｉ姆３、．Ｒｈ２等，后者包括ＧＳ－Ｒｅ、．Ｒｆ、．Ｒｇｌ、．Ｒ９２、．Ｉｍｌ等［２】。

１．２人参皂苷的药代动力学

研究表明，人参皂苷在肠内菌群及消化液的作用下发生代谢性转变。在肠内，人参皂苷主要受细菌有关酶类的作用，而从末端糖逐步裂解连接在苷元上的寡糖。通过这种脱糖基化作用，原人参二醇组皂苷经过中间产物（如ＧＳ—ｌＨ、．Ｆ２）阶段，生成的主要代谢产物是化合

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物Ｋ（ｃｏｍｐｏｕｎｄＫ，Ｃ．Ｋ），即２０一０．ｐ．Ｄ－吡喃葡萄糖苷基２０Ｓ一原人参二醇，Ｃ．Ｋ还可再脱糖基生成２０Ｓ一原人参二醇（ｐｐｄ）【３１。原人参三醇组皂苷通过脱糖基化，主要经过ＧＳ．Ｒｈｌ、．Ｆｌ等中间产物阶段，生成２０Ｓ．原人参三醇（ｐｐｔ）【４】。

应用ＴＬＣ、ＨＰＬＣ．ＭＳ、ＮＭＲ和ＥＬＩＳＡ进行检测和分析的结果表明，ＧＳ—Ｒｂｌ和ＧＳ．１吨ｌ经口给药后在肠内的吸收率均极低，前者吸收的主要分子形式是Ｃ—Ｋ，以及ＧＳ．Ｒｄ、ｐｐｄ；后者主要以ｐｐｔ及ＧＳ－Ｒｈｌ形式吸收【５矧。用酶免方法测定给大鼠口服Ｋ物质后的药物代谢，发现１５缸ｎ后血浆中出现Ｋ物质，且很快达到高峰，维持时间长达１０ｈ以上，说明口服Ｋ物质吸收很快，消除慢。口服Ｒｂｌ后４ｈ血浆中才出现Ｋ物质，７ｈ达高峰，高浓度维持达１５ｈ，２４ｈ后血浆中仍能检测出，但２４ｈ内未检出Ｒｂｌ。这提示Ｒｂｌ较长时间被胃肠道细菌转化为Ｋ物质，然后在胃肠道的下端被吸收。Ｗａｋａｂａｙａｓｈｉ【刀等给小鼠口服Ｒｂｌ、Ｋ物质也出现了类似的结果。王毅【８】等在ＧＳ．Ｒｇｌ的药代动力学研究中发现在大鼠尿和血中有Ｒｈｌ／Ｆｌ存在。且在人的尿中也检测到Ｒｈｌ。

１．３人参皂苷去糖基化与药理活性的关系

近年来的文献报道，多种人参皂苷在多方面的药理活性依赖其去糖基化。小鼠在体实验显示，ＧＳ．Ｒｂｌ和Ｃ．Ｋ经口给药后，两者都能显著抑制叔丁基过氧化氢（ｔ．ＢＨＰ）诱导的血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）和天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）增高，但是，在ＨｅｐＧ２细胞培养体系中，Ｃ．Ｋ对ｔ．ＢＨＰ诱导的细胞毒效应具有保护作用，而ＧＳ．Ｒｂｌ没有这样的作用【９１。Ｃ．Ｋ作腹腔内注射给药能抑制化合物４８／８０诱导的小鼠搔抓行为，

四种人参＝醇组皂苷对小鼠骨髓ＭＳＣ体外生长的影响及相关实验技术的研究

Ｇｓ．Ｉ№ｌ作腹腔内给药却没有ｃ．Ｋ的止痒剂作用。ｗａｋａｂａｙａｓｈｉ掣刀报告，Ｃ．Ｋ在体内能抑制黑素瘤细胞的转移，在体外培养条件下抑制肿瘤细胞的浸润；人参标准提取物和人参皂苷经口给药也具有与Ｃ．Ｋ相同的肿瘤细胞转移抑制作用，但没有Ｃ．Ｋ在体外培养条件下的相同效应。Ｌｉｕ等【１０１研究了原人参二醇和原人参三醇两家族皂苷及其一些衍生物对大鼠肝微粒体ＣＹＰ３Ａ活性的影响，结果显示ＧＳ－Ｒｂｌ、－Ｉ妯２、一Ｒｃ、Ｃ－Ｋ、－Ｒｅ和Ｒｇｌ不影响ＣＹ．Ｐ３Ａ的活性，而ＧＳ－Ｒ９２、ｐｐｄ和ｐｐｔ对ＣＹＰ３Ａ具有竞争性抑制作用。陈英杰【１１】等通过比较２１种人参皂苷单体对六种瘤细胞的杀伤作用，对ＧＳ抗肿瘤活性构效关系进行研究，发现抗肿瘤活性受糖基的影响强弱规律是：单糖苷＞二糖苷＞三糖苷＞四糖苷。Ｗ狄ａｂａｙａｓｈｉ【１刁报道，ＧＳ．Ｒｅ、一Ｒ９１及其肠道菌代谢物ｐｐｔ口服后具皆有很强的抗肿瘤细胞转移活性，而静脉注射后只有ｐｐｔ具有很强的抗转移活性，说明Ｒｅ、ＲｇＩ口服抗转移活性是由代谢物ｐｐｔ介导的。这些研究表明，人参皂苷脱糖基化产物才是直接作用于组织细胞的高活性分子形式。

１．４人参皂苷对体外培养条件下骨髓细胞的影响

体外培养条件下，人参皂苷对骨髓造血细胞的生物活性有不少研究。多篇文献报道了人参总皂苷、ＧＳ．Ｒｇｌ、．Ｒｂｌ能促进骨髓造血干／祖细胞的体外增殖与分化【１３－１６１。陈晓建等【１７］报道人参总皂苷、ＧＳ．Ｒｇｌ、．Ｒｂ。能刺激脐血ＣＤ３４＋细胞集落形成，而且单体皂甙的作用优于人参总皂苷。王莎莉‘１８】等发现，人参总皂苷可刺激巨噬细胞，上调造血调控因子ＥＰＯ、ＧＭ．ＣＳＦ、ＩＬ．３、ＩＬ．６的合成和分泌，促进造血干／祖细

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胞的增殖分化。李静等【１９】的工作显示，用人参总皂苷诱导大鼠骨髓巨噬细胞，其培养上清可提高髓系造血祖细胞的集落产率，受诱导的骨髓巨噬细胞高水平表达ＥＰＯＩＩｌ】［ⅢＡ、ＧＭ．ＣＳＦ删ⅢＡ，ＥＰＯ、ＩＬ．３、ＩＬ．６、ＧＭ．ＣＳＦ蛋白水平有不同程度的提高。

人参皂苷对非造血谱系骨髓细胞的作用，目前仅见少数几篇文献报道。卢新政【捌等应用成纤维细胞体外集落形成法、【３Ｈ】ＴｄＲ掺入实验和ＭＴＴ试验，研究了人参皂甙Ｒｇ．对体外培养猪骨髓基质细胞增殖的影响，结果表明人参皂甙Ｒｇ，对骨髓基质细胞增殖 …… 此处隐藏：2411字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……