HIV抗体快速检测SOP(4)

第二章 标准操作程序

【原理】 利用双抗原夹心法检测HIV抗体。标本加入反应板，若标本中含有HIV抗体时，先与金标抗原反应，形成抗体-金标抗体复合物，在虹吸作用下向前移动，遇到包被抗原形成抗原-抗体-金标抗原复合物，并出现红色沉淀线。包被膜上同时带有一条质控包被线作为对照，所以当出现一条红色质控线和一条（或两条）红色反应线时判断为阳性。当待测标本中无HIV抗体时，只出现一条红色质控线则判断为阴性。作为质控，不管结果为阳性或阴性，都会出现一条红色质控线。如无红色质控线（或只有反应线）出现，则实验无效。 【HIV筛查试验操作程序】 （一） 试验前准备：

1、试验开始前将试剂和样品放置于室温（18~23℃）半小时。 2、换隔离衣，戴好帽子、口罩、双层手套。 （二） 试验操作：

1、去掉外包装，标记上血清编号；

2、用移液器加50ul的血清或血浆样品至反应堑； 3、如是全血则需加入1滴Chase缓冲液；

4、等至少15分钟后读取结果，最迟不超过60分钟。 （三）试验结果

1、阳性：出现两条或三条红线均为阳性反应。 2、阴性：仅出现质控一条红线，则实验结果为阴性。

3、无效：如无红线（或只有反应线）出现，表明实验无效，须重新检测。 （四）报告：对呈阴性反应的样品，可由实施检测的实验室出具HIV抗体快速检测阴性报告；对呈阳性反应的样品，须进行复检，不能出阳性报告。

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第三章 结果报告与注意事项

【复检试验】

对快速检测呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种试剂复测均呈阴性反应，则报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。（具体详见流程图）

【筛试验结果的报告】

对HIV抗体快速检测试验，呈阴性反应者可出具“HIV抗体阴性”报告。

对快速检测试验呈阳性反应者不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查”报告。

【初筛试验呈阳性反应样品的转送】

如需送上级实验室进行复测或确认，需要填写“HIV抗体复测送检单”，经1名检验人员和1名具有中级以上技术职称的人员审核签字，与血样品一同送天山区疾控中心实验室，再转送市疾控中心艾滋病确认实验室，或在本实验室复检后直接送确认实验室。

【操作台消毒处理】

用3~5?消毒液擦拭台面，如工作台被溢出物污染，则用消毒液浸泡30分钟后，再行擦拭。

【房间消毒】

每日用紫外线照射30~60min

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【方法学特性及注意事项】

a) b) c)

试剂盒4~30℃干燥保存。有效期16个月。 抗凝全血应采用EDTA，样品应避免溶血。

样品应在收集后7天内检测，2~8℃保存，如果大于7天，应冷冻保存。

d)

测试卡仅用于HIV抗体的现场初筛，检测阳性必须用ELISA方法进一步确认。

e) f) g)

样本的加样应使用微量加样器准确加入。 实验环境应保持一定湿度、避风，18~25℃进行。

本试剂盒应视为有感染源的物品，应按生物危险样品处理。

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第三部分 流程图

HIV快速检测策略，根据检测点现场条件可分为以下二类

3.1当检测点上有两种快速检测试剂时 3.1.1常规检测：

3.1.1.1初筛试验，用敏感性高的快速检测试剂，结果为阴性，则报告阴性；结果为阳性反应，则进入复检试验。

3.1.1.2复检试验，在同一检测点，用第一种快速试剂加上第二种快速试剂进行复检。两种快速试剂复检结果均为阴性，则报告阴性。如一阴一阳或两种均为阳性反应，则按《全国艾滋病检测技术规范》要求送艾滋病确证实验室进行确证试验。

3.1.1.3根据检测结果进行咨询，检测结果为阴性的按阴性咨询，对两种快速检测结果均为阳性反应或一阴一阳反应的，按照疑似阳性咨询（流程图3.1），建议尽快进行确证试验。

图3.1 HIV抗体快速检测流程图

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3.1.2应急检测:

在一些特殊情况下，如职业暴露、孕妇产时和手术前等，建议应用两种快速检测试剂同时检测，如两种试剂检测结果均为阴性，则报告阴性。如一阴一阳或两种均为阳性反应，则按《全国艾滋病检测技术规范》要求送艾滋病确证实验室进行确证试验。同时，对检测结果为阴性的按阴性咨询，检测结果为一阴一阳或两种均为阳性反应的按照疑似阳性咨询（流程图3.2）

图3.2 HIV抗体快速检测流程图

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