微生物实验室规范操作

微生物实验室规范操作卫生部北京医院 张秀珍

世界卫生组织(WHO)对临床微 生物实验室提出三项指导性方针：

(1)临床微生物实验室尽可能把目标集中在 快速诊断方面； (2)显微镜检查对建立快速的初步诊断具有 很大价值； (3)实验室人员必须主动与临床结合，将实 验室数据转化为临床有用的信息。

严峻的感染形势

感染性疾病并没有象人类曾经所预料的那样随着抗 感染化疗时代的到来而逐一销声匿迹。多种原因造 成的易感人群增加; 多重耐药菌如甲氧西林耐药的金葡菌(MRSA)、 产ESBL的肺炎克雷伯菌和大肠杆菌、泛耐药的铜 绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌等不断涌现并持续蔓延， 原先少见的病原如曲霉菌、念珠菌等深部真菌越来 越常见; 新发感染病原如SARS、禽流感、手足口病、甲型 H1N1流感等也此起彼伏，感染性疾病仍然是人类 关注的热点。

临床微生物实验室在感染诊疗 中的地位

改变感染性疾病的预后，关键是疾病的早期诊断和有 效的抗感染治疗。临床微生物检验在感染性疾病的诊 断和治疗中，具有决定性价值。 感染主要是由病原微生物引起的，微生物正确检验， 是建立准确的感染性疾病病原学诊断和针对性的给予 抗感染治疗的前提和基础。良好的微生物检验，可以 缩短感染确诊的时间，同时可以使抗感染治疗准确率 提高，从而达到降低医疗费用、改善疾病预后。 而错误的微生物检验，将导致错误的病原学诊断和错 误的临床用药决策。

临床微生物检验的主要任务

⑴对微生物标本做出快速、准确的鉴定报告， 及时满足临床的需要； ⑵进行有关抗菌药物耐药性方面的各种试验， 受理抗菌药物合理应用的咨询； ⑶密切结合临床，与临床医师讨论、研究及处 理有关感染性疾病的问题； ⑷参与抗菌药物临床合理应用的管理和医院感 染监测、控制和管理。

卫生部 国家中医药管理局 总后 卫生部发布卫医发 2004 285 号文件关于实施《抗菌药物临床应用指 导原则》的通知

2009-01-9-11卫生部关 于合理应用抗菌药物的 星火计划启动三年180个省市8个专业组,包括微生 物实验室,药房,呼吸,血液,儿科,ICU, 感染科,30000-45000个医生或实验 室接受培训.

萌芽计划:2009年6月启动

3年培训450名二级甲等医院微生物实验室技术 人员 规范常规微生物检验技术 提高基层医院微生物检验人员的业务水平 更新老的实验诊断理念和方法

目的

微生物实验室应适应临床需要

正确 规范操作 快速 建立新的理念及时报告 有效 与临床沟通把实验室数据变为有用的信 息

1.标

本采集和运输棉 花 纤 维 + 竹 / 木 条

抑 菌 区 是 因 为 ： 植 物 分 泌 出 来 的 ： 脂 肪 酸 ； 树 脂 ； 福 尔 马 林

氯 气 ， 重 金 属 与 胶 水 的 影 响

美 国 与 欧 洲 对 实 验 室 的 新 要 求

NCCLS M40 标 准 DIN 58942 标 准

推荐COPAN Amies 运 送 培 养 基

多用途运送系统 – 需氧 + 厌氧 低 氧 化 的 环 境 –不会对 标本的微生物造成损害 拭 子 是 深 入 培 养 基 中 来 保 护 苛 养 菌 与 厌 氧 菌 两面是以塑料密封,不透水和 漏气 – 减少污染和维持缺氧 环境

流感嗜血杆菌在三种不同的运送基的存活率

ASM 2004

2.血液及骨髓标本的收集美国和英国血液培养指南

采血时间：尽可能在用抗生素前，心内膜炎和导 管相关性感染例外。 2. 采血量：采一次或采一瓶是错误的，应采2-3 套，至少应采一套 2瓶，分需氧和厌氧。2瓶血量 不少于 16-20ml,先将10ml注入需氧瓶，再将剩余血 采血注入厌氧瓶。 3. 采血方法：不要与血气和血沉标本一起采血；不 推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜 在静脉导管或静脉留置口采血。

1.

血液及骨髓标本

4. 采血间隔：如第一次采集2套(4瓶)血培养标本， 在以后的 2-5 天不必采血，但除外心内膜炎和导管相 关性败血症。 5. 儿童：采血量是总血量的1%。,不做厌氧培养. 6. 延迟培养瓶处理: 延迟培养瓶不要放冰箱或孵箱, 放常温，尽早送往临床细菌室。 7. 皮肤消毒液推荐：建议先用70-80%异丙醇去脂， 再用葡萄糖酸氯乙定消毒。